关于PCR-RFLP错误的是()。
A.采用特定的限制性内切酶对PCR产物进行处理
B.需先进行PCR扩增
C.突变位点不必在限制酶识别序列中
D.判断有无点突变
E.对酶切后的片段长度进行分析
C解析:CAPs(cleaved amplification polymorphism sequence-tagged sites) CAPs技术又称为PCR-RFLP,限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术。是用特异设计的PCR引物扩增目标材料时,由于特定位点的碱基突变、插入或缺失数很少,以至无多态出现,往往需要对相应PCR扩增片段进行酶切处理,以检测其多态性。CAPs标记在二倍体植物研究中可发挥巨大的作用,是PCR标记的有力补充。但在多倍体植物中的应用有一定的局限性。另外,CAPs标记需使用内切酶,这又增加了研究成本,限制了该技术的广泛应用。PCR-RFLP的基本原理是用PCR扩增目的DNA(B正确),扩增产物再用特异性内切酶消化切割成不同大小片段(A正确),直接在凝胶电泳上分辨。不同等位基因的限制性酶切位点分布不同,产生不同长度的DNA片段条带(E正确)。此项技术大大提高了目的DNA的含量和相对特异性,而且方法简便,分型时间短。简而言之,就是先PCR扩增相应目的片断,而后进行限制性内切酶切反应,电泳后观察比较限制性图谱来分析序列之间的差异(D正确),而非观察片段长短。